DNA电泳缓冲液怎么选？TAE or TBE
发布时间：
2025-12-09
大大的疑惑
DNA电泳缓冲液怎么选？
·TAE·or·TBE·
在日常分子生物学实验中，我们常常面临一个选择：进行DNA电泳时，到底该用TAE还是TBE缓冲液？这个看似简单的决定，实际上直接影响着电泳的分辨率、条带质量以及下游实验的成功率。简单来说，没有绝对的“更好”，只有“更合适”。
今天，就让我们彻底弄明白这两种缓冲液的区别，助你实验一臂之力！
01
核心区别与选择原则
01
TAE（Tris/乙酸）
特点
缓冲容量较低，导电性较低。
优点
大片段分离效率高
对大于1500bp的大片段DNA分离效果更好，条带更清晰。
利于下游实验
是DNA回收、克隆和测序等后续实验的首选，因为TBE中的硼酸盐离子可能干扰酶促反应。
缺点
缓冲能力弱
长时间跑胶可能导致缓冲液两极pH变化，影响结果。
小片段分离差
对小于1000bp的小片段DNA分离能力不如TBE。
02
TBE（Tris/硼酸）
特点
缓冲容量较高，导电性较高。
优点
小片段分离极佳
对小于1000bp的小片段DNA（特别是小于100bp）有超强的分离能力，条带更锐利。
稳定性好
适合长时间、高电压的电泳，结果稳定可靠。
缺点
大片段分辨率差
可能导致大片段DNA条带模糊或不整齐。
可能干扰酶活
硼酸根离子可能抑制某些后续反应的效率（如酶切或连接反应）。
02
实用选择指南
01
优先选择TAE缓冲液的情况
• 大片段DNA分离（>1000bp）
如基因组DNA、大质粒、BAC/PAC载体等的电泳
• 需进行下游酶反应的样品
如胶回收后直接进行酶切、连接、PCR等实验
• 常规快速检测
如PCR产物初步验证、质粒提取后的纯度检测
• 超螺旋DNA分析
TAE能更准确反映超螺旋DNA的真实分子量
02
优先选择TBE缓冲液的情况
• 小片段DNA分离（<1000bp）
如小片段PCR产物、siRNA、miRNA等的分离
• 需要高分辨率的实验
如基因型鉴定、RFLP分析等
• 长时间电泳（>4h）
如脉冲场电泳、变性梯度凝胶电泳等
• RNA电泳
如Northern blot等RNA分析实验
03
重要注意事项
1.不可混用
切勿将TAE和TBE混合使用，凝胶配制和电泳槽中的缓冲液必须一致。
2.浓度一致
确保凝胶和电泳槽中的缓冲液浓度相同（通常为1×），否则会影响DNA迁移。
3.TBE后续处理
使用TBE电泳后如需进行酶反应，必须通过乙醇沉淀或柱纯化去除硼酸盐。
4.长时间电泳考虑
使用TAE进行长时间电泳时，最好有缓冲液循环装置或中途更换缓冲液。
总结
选择TAE还是TBE，本质上是在分辨率、稳定性和下游兼容性之间取得平衡的过程。
记住这个万能公式：
大片段/要做酶促反应/日常检测 → 选TAE；
小片段/高分辨率/长时间电泳 → 选TBE。
在DNA电泳前可以花几秒钟考虑一下实验需求，这样就能做出更合适的选择，避免不必要的失败和重复实验！
希望这篇指南能帮助你在科研道路上更加得心应手！
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