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精准的移液

从每一次用心的按压开始

前言

正确握持姿势：

像握笔一样轻握移液枪，保持手腕和前臂放松。许多研究人员习惯紧握枪柄，这会导致手部疲劳和操作不稳定。

移液前进行预润洗：

预润洗是为了平衡枪头内的蒸汽压并减少液体吸附，从而确保移液体积的精确性。

预润洗步骤：先吸取目标液体至枪头内，然后将其完全排回原容器或弃去，此过程重复2-3次，使枪头内壁达到吸附饱和和环境平衡，之后再正式吸取待转移的液体。

但是请注意：高温或低温（如冰点以下）的液体请不要润洗。

举例：

某实验室在进行qPCR实验时，重复性始终不理想。最终发现是因为操作人员未充分预润洗枪头，导致移液不精准，CT值偏差高达1.5个循环。

温度补偿：

液体温度与枪体温度差异会导致明显的体积误差。当试剂温度高于环境温度4℃时，误差可达0.3%以上。最佳操作方法是将试剂、枪头和移液枪在同一环境中平衡30分钟后进行实验。

高原实验室特别提示：

海拔每升高1000米，大气压降低约10%，会导致移液体积增加约1%。在高海拔地区实验室，必须使用经过同海拔高度校准的移液器。

反向移液法：

处理高粘度液体（如甘油、蛋白质溶液）时，传统移液方法误差显著。采用反向移液法——先将活塞按到第二停点，吸取液体，排放时只按到第一停点，可将误差从±5%降低到±1%以内。

连续分液模式：

当需要向多个孔板中加入相同体积液体时，使用移液枪的连续分液功能，不仅提高效率，还能减少因多次吸取造成的误差积累。

举例：

一项细胞实验中，研究人员发现不同批次的细胞培养基添加DMSO后，细胞存活率差异显著。最终追溯到是因为DMSO粘度高，而实验人员未使用反向移液法，导致实际添加体积不一致。

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A: 聚丙烯材质，避免塑料添加剂溶出。

A: 移取1μL以下体积时，必须使用经校准的超微量移液器、配合低吸附枪头，在温湿度受控的环境中采用预润洗和反向移液等精密操作技术，以最大限度减少蒸发、吸附和表面张力造成的体积误差。

A: 定期进行称重法验证，吸取去离子水称重，通过密度换算验证准确性。

结语